高磷对维持性血透患者微炎症和氧化应激影响和机制.pdf
赵金香+李耀华+谢萍
摘要：目的 观察黄葵胶囊对糖尿病肾病维持性血液透析患者微炎症和氧化应激状态的治疗作用。方法 选择2014年甘肃省人民医院透析时间>6个月的糖尿病肾病患者46例，随机分为观察组和治疗组各23例，同时选取20名健康体检者作为对照组。观察组给予常规枸橼酸碳酸氢盐血液透析治疗，每次4 h，每周3次；治疗组在此基础上加用黄葵胶囊，每次2.5 g，每日3次，口服。观察组和治疗组均治疗8周，检测治疗前后血浆中炎症指标高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞（WBC）及氧化应激指标丙二醛（MDA）、循环晚期氧化蛋白产物（AOPP）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）变化。结果 与对照组比较，观察组和治疗组治疗前hs-CRP、IL-6、TNF-α、WBC、MDA和AOPP水平明显升高（P<0.01），SOD和GSH-Px水平明显降低（P<0.01）；观察组和治疗组比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，观察组IL-6、hs-CRP、MDA和AOPP水平明显升高（P<0.05），GSH-Px和SOD水平明显降低（P<0.05），TNF-α和WBC无显著变化（P>0.05）；治疗组IL-6、TNF-α、hs-CRP、WBC、MDA和AOPP水平明显降低（P<0.01），SOD和GSH-Px水平均明显升高（P<0.01）；治疗后观察组与治疗组上述各指标比较，差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 糖尿病肾病维持性血液透析患者体内普遍存在微炎症和氧化应激状态，黄葵胶囊可改善患者微炎症和氧化应激状态。
关键词：黄葵胶囊；糖尿病肾病；维持性血液透析；微炎症；氧化应激
糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是导致终末期肾病（end-stage renal disease，ESRD）的主要原因，也是糖尿病最常见的慢性微血管并发症和死亡原因，30%的糖尿病患者最终发展为DN[1]。随着经济的发展和人民生活水平不断提高，2型糖尿病发病率逐年增高，国际糖尿病联盟预计，到2030年全球将有糖尿病患者5.52亿[2]，DN数量将随之增加。研究表明，DN患者普遍存在微炎症与氧化应激状态，诱导了肾组织损伤，并导致多种透析相关并发症发生[3]。因此，积极控制微炎性反应和改善氧化应激状态，可能延缓DN进展，降低DN并发症的发生，提高患者生存质量。黄蜀葵最早记载于《嘉佑本草》，性味甘、寒，入心、肾、膀胱经，有利水通淋、清热解毒之功效；《中药辞海》[4]记载其微甘、凉，有清热利湿、拔毒排脓之功效。现代药理研究表明，黄蜀葵主要化学成分为5种黄酮类化合物单体，具有抑菌、抗炎、抗凝、降脂、抗氧化、降低免疫反应及炎症复合物沉积、减轻肾小管损伤等作用[5]。本研究探讨黄葵胶囊对DN维持性血液透析患者微炎症和氧化应激状态的影响，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2014年1-12月甘肃省人民医院血液净化中心透析时间>6个月的DN患者46例，按住院号随机分为观察组和治疗组各23例，其中男24例，女22例，年龄43～69岁，平均年龄（56.1±8.3）岁。另设体检中心健康体检者20例作为对照组。观察组和治疗组在性别、平均年龄、平均透析时间、体质量、血红蛋白（Hb）、血清白蛋白（ALB）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、24 h尿蛋白定量、利尿药物使用比例和ACEI/ARB使用比例上差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。本研究经甘肃省人民医院伦理委员会审批（审批号syll20140078
2 纳入标准
①透析时间>6个月，病情稳定；②近期无急性感染及炎症反应；③无活动性风湿性疾病；④无慢性消耗性疾病如肿瘤、结核等；⑤无严重的肝脏、血液系统疾病；⑥过去1个月内未使用维生素C、维生素E、大黄、免疫抑制剂及其他抗氧化药物；⑦签署知情同意书。
1.3 排除标准
①病情进展需要紧急终止者；②出现严重不良反应，如对黄葵胶囊过敏、难以治疗的消化道症状等；③以任何理由要求退出本试验者。
1.4 治疗方法
观察组和治疗组均予血液透析[血液透析机，瑞典金宝公司AK 200 Ultra S型，高通量聚砜膜透析器（2.0 m2）]。采用枸橼酸碳酸氢盐透析液（含1.25～1.5 mmol/L钙离子、2.0 mmol/L钾离子、135～145 mmol/L钠离子），透析液流量500 mL/min，血流量200～300 mL/min，每周3次，每次4 h。同时给予药物控制血糖、血脂、血压，纠正贫血、电解质紊乱和补钙等常规治疗。治疗组在透析和常规治疗的基础上，加用黄葵胶囊（江苏苏中药业集团股份有限公司，批号14083121，0.5 g/粒），每次5粒，每日3次，口服。2组均治疗8周。
1.5 观察指标
对照组于研究开始后、观察组和治疗组于治疗前后分别检测丙二醛（MDA）、循环晚期氧化蛋白产物（AOPP）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞（WBC）。血液标本采集前禁食8～10 h，次日晨起空腹采静脉血5 mL，血清学检测标本30 min内分离血清，-80 ℃冰冻保存备检；Hb和WBC用含EDTA血常规试管收集标本，采用深圳迈瑞BC-2600全自动血液细胞分析仪测定；ALB、FBG、HbA1c、TC、TG、BUN和SCr采用美国贝克曼CX7+型全自动生化仪检测；血清AOPP、IL-6和TNF-α采用酶联免疫吸附法检测，试剂盒由北京北方生物研究所提供；SOD、GSH-Px和MDA采用日本UV-2401PC紫外分光光度仪测定，试剂盒由南京建成科技有限公司提供；hs-CRP采用透射免疫比浊法检测，试剂盒由德国德赛诊断公司提供。
1.6 统计学方法
采用SPSS19.0统计软件进行分析。计量资料以 —x±s表示，采用t检验；计数资料以样本数（%）表示，采用χ2检验。检验结果判定使用双侧检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 2组治疗前后微炎症指标比较
治疗前与对照组比较，观察组和治疗组hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均明显升高（P<0.01），观察组与治疗组比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，与本组治疗前比较，观察组hs-CRP、IL-6水平升高（P<0.05），TNF-α、WBC水平无明显变化（P>0.05）；治疗组hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均明显降低（P<0.01）。治疗后，观察组和治疗组hs-CRP、IL-6、TNF-α、WBC比较，差异有统计学意义（P<0.01）。结果见表2。
2.2 2组治疗前后氧化应激指标比较
治疗前与对照组比较，观察组和治疗组MDA、AOPP水平升高（P<0.01），SOD、GSH-Px水平降低（P<0.01）；观察组与治疗组比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，与本组治疗前比较，观察组MDA、AOPP水平升高（P<0.05），SOD、GSH-Px水平降低（P<0.05）；治疗组MDA、AOPP水平明显降低（P<0.01），SOD、GSH-Px明显升高（P<0.01）。治疗后观察组和治疗组MDA、AOPP、SOD、GSH-Px比较，差异均有统计学意义（P<0.01）。
3 讨论
DN属中医学“消渴”合并“水肿”“尿浊”“关格”“肾萎”等范畴。病因病机主要为消渴患者饮食不节，嗜食肥甘厚味，湿热内蕴，邪毒入络，最喜伤肾，肾失封藏，精微下泄或气化失司，而致水液潴留[6]。黄葵胶囊具有清利湿热、解毒消肿之功效，主治慢性肾炎湿热证，症见浮肿、腰痛、蛋白尿、血尿、舌苔黄腻等，与DN病机相吻合。研究表明，黄蜀葵中黄酮类通过抑制caspase-3和caspase-8的表达，减少ED1+和ED3+巨噬细胞浸润，可清除氧自由基，降低脂质过氧化酶水平，保护肾脏免受损害[7]。
近年来，越来越多的研究表明微炎症和氧化应激反应在DN发生发展过程中发挥着极为重要的作用[3，8]。DN患者处于高血糖、脂代谢紊乱状态，一方面可以协同刺激肾脏固有细胞产生大量炎性因子，如CRP、IL-6等，激活蛋白激酶C通路、丝裂原活化蛋白激酶等信号通路，促进下游的各种致纤维化细胞因子，如转化生长因子-β、TNF-α等基因转录和蛋白质表达，出现细胞凋亡、细胞外基质过度沉积、系膜细胞增生、肾小球基底膜电荷屏障受损；另一方面产生过多的活性氧簇产物，如MDA、超氧阴离子、羟自由基等，这些氧化应激产物不能迅速被肾组织内抗氧化物质如SOD、GSH-Px等清除，晚期糖基化终产物、AOPP增多，继而激活多元醇通路，使葡萄糖大量转化为山梨醇，通过渗透性作用对肾脏细胞产生损伤，微炎症和氧化应激相互作用最终引起DN[8-9]。由于DN维持性血液透析患者免疫功能紊乱、继发感染、透析膜和透析液的生物不相容性，使其更易处于微炎症和氧化应激状态[10]，目前认为微炎症和氧化应激状态可作为判断DN预后的可靠指标，改善微炎症和氧化应激是治疗DN的新靶点[11]。
本研究结果显示，与健康志愿者比较，治疗前观察组和治疗组微炎症因子hs-CRP、IL-6、TNF-α和WBC水平均升高，氧化应激产物AOPP和MDA水平升高，抗氧化物SOD和GSH-Px水平下降，提示DN维持透析患者处于微炎症和氧化应激状态，与Babaei M等[12]研究结果一致。治疗8周后，观察组炎症因子hs-CRP和IL-6水平升高，氧化应激产物MDA和AOPP水平升高，抗氧化物GSH-Px和SOD水平降低，表明血液透析加剧了微炎症状态和氧化应激状态；TNF-α和WBC治疗前后无明显变化，可能与患者免疫功能低下有关。治疗组炎症因子IL-6、TNF-α、hs-CRP、WBC水平均明显降低，氧化应激产物MDA、AOPP水平明显下降，抗氧化物SOD、GSH-Px明显升高，说明黄葵胶囊具有降低炎症氧化应激的作用。毛志敏等[13]研究发现，黄葵胶囊能抑制DN氧化应激，改善肾纤维化，本研究也发现黄葵具有同样作用。
本研究表明，DN維持性血液透析患者体内存在微炎症和氧化应激状态，黄葵胶囊改善了微炎症和氧化应激状态，为DN治疗提供了新的思路，其机制还有待进一步探讨。同时，本研究样本例数偏少，研究历时也较短，需进行多中心随机对照试验，随访观察长期疗效，进行远期生存分析。
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